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蛋白提取(贴壁细胞)

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一、贴壁细胞

1. 将细胞培养皿上的培养液抽出,用10 mL PBS 清洗一遍。

2. 放400uL RIPA裂解液(中皿),用细胞刮子刮取细胞,收集于EP管中。

3. 超声1分钟

4. 13000 rpm 4°C离心5分钟,取上清

5. 加入4uLPMSF

6. 冻存于-20°C

二、悬浮细胞

1. 细胞培养液于1000rpm离心5分钟,弃上清

2. 沉淀中加入400 uL RIPA裂解液(中皿)

3. 超声1分钟

4. 13000 rpm 4°C离心5分钟,取上清

5. 加入4uLPMSF

6. 冻存于-20°C

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