大肠菌群计数含MPN表(总3页)
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大肠菌群计数
是一种估计悬浮在水溶液中活菌数的方法。
一般分几组进行，每一组各有数重复，分别以渐次的方式加入不同量的待测水溶液于培养液中进行培养，随后观察每一组中的试管是否有菌生长，然后再利用统计表估计菌数。
例如水中coliform数的测定，将待测水溶液以10ml,1ml 及 的量分别加入各组，每组三重复，经培养后观察 coliform 是否有生长，统计有菌生长的管数，以统计表统计菌数。
活菌的浓度可利用 MPN 的方式来估计，方式简单，可分为下列两步骤：
在培养基中作数个重复稀释；
记录有菌生长的试管。 若试管中无生长，则可能代表连一支菌都没有生
长。 从统计观点， MPN 这个方法是一种非常没效率的方式，因为每一试管与培养皿表面生长的菌数只有很小部分符合。然而 MPN 的好处有以下：
若菌无法长在固态培养基时，便可使用；
若菌的生长的动力学具有很大变化，便可使用：假设某些菌会会立即且迅
速的生长，且会在固态培养基产生很大的菌落，且与我们要的菌落接触到或盖过时；因为较少且具高度游动性或快速生长的菌，可能形成小菌落，因而其数量是很多而导致无法计数；
假如非我们所要菌存在，或无筛选的方法存在时，便可使用。 虽然有污染
的细菌可以大量生长，但仍可藉由我们所要看的菌产生特定的产物来估计；
假如琼脂或其他固化材料有某些因素会干扰我们计数时，便可使用
大肠菌群MPN表
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0 0 0 0 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 正反应试管数 0 0 1 2 0 0 1 1 2 0 0 1 1 2 2 3 0 0 0 1 1 1 2 2 2 3 3 3 3 MPN/ml （ g ） 0 1 0 0 0 1 0 1 0 0 1 0 1 0 1 0 0 1 2 0 1 2 0 1 2 0 1 2 3 93 15 210 240 460 1,100 > 1,100 23 39 43 75 120 9 14 15 20 21 28 - 4 7 7 11 11 < 3 3 3 - 95% 信赖界线 下限 上限 < 5 9 < 5 13 - - < 5 20 1 21 1 23 3 36 3 36 1 36 3 37 3 44 7 4 47 10 150 - - 4 120 7 130 15 380 7 210 14 230 30 380 15 380 30 440 35 470 36 1,300 71 2,400 150 4,800 > 150 > 4,800 说明：
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若稀释倍 数为 10 ， 100 ， 1000 倍（即每 ml LST 中 ， ， ml （ g ）之检体），且 LST 均产气（正反应试管数 3-3-3 ），经接种至
EC ，而其产气试管数为3-1-0 ，对照 MPN 为 43 ，即为该检体大肠杆菌 MPN 数为 43/ml （ g ）。
若稀释倍数为原液， 10 ， 100 倍 ( 即每 ml LST 中含 1 ， ， 之检体而 EC 接种之正反应试管数亦为 3-1-0 ，则该检体大肠杆菌 MPN 数为
43 ÷ 10=4. 3/ml 。
若稀释倍数为 100 ， 1000 ， 10000 倍时，结果同上，则该检体大肠杆菌 MPN 数为 43×10=430/ml ，其余类推。 计算公式： （ ml ）
平板计数法：采用常规涂布平板法，37℃24h后计数。培养基为营养琼指和伊红美兰琼脂。
多管发酵法：采用五管法，培养剂为液体EC培养基。 细菌总数：采用AODC法， 具体操作按徐怀恕方法进行。
活菌直接计数：采用Kogure等方法：向水样加入%萘啶酮酸和%酵母膏，在
37℃下培养6-24h，加入甲醛（最终浓度为2%）固定，再按AODC法镜检计数。
×中间试管之稀释倍数＝ MPN ／ g
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