加工技雍 ■ 中图分类号:TQ937 文献标志码:A 文章编号:1674—3547(2014)0l_0038—05 大豆肽免疫调节作用的研究进展 富校轶 ,孙茂 成 ,高永欣 ,张佰荣 ,王舒然 (1.吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林132013;2.吉林化工学院化工与生物技术学院,吉林吉林132(}22) 摘要:通过体内和体外实验发现,大豆肽是一类具有免疫调节作用的生物活性肽,可以改善机 体的免疫功能,在功能性食品领域将大有所为。文章就大豆肽对免疫系统中非特异性免疫、细 胞免疫和体液免疫等方面的调节作用进行综述,并对目前研究过程中存在的问题进行了讨论。 关键词:大豆肽;免疫调节作用;研究进展 ’ Progress on Immunological Regulation of Soybean Peptides Fu xiaoyi’,Sun Maocheng ,Gao Yongxin ,Zhang Bairong ,Wang Shuran (1.School of Public Health,Jilin Medical College,Jilin 1 320 1 3,Jilin,China; 2.College of Chemical Engineering and Biotechnology,Jilin Institute of Chemical Technology, Jilin 1 32022,Jilin,China) Abstract:Soybean peptides is a class of bioactive peptides with immunological regulation function in numerous studies.The present situations of immunological regulation of soybean peptides,including non— specific immunity,cellular immunity and humoral immunity were summarized in this review.Then the potential problems of soybean peptides in the research process were discussed at last. Key words:Soybean peptides;Immunological regulation;Progress 大豆是生物活性肽极好的来源。大豆肽是指 以大豆蛋白为原料,经水解、分离和精制等过程 后,获得通常由3-6个氨基酸组成的相对分子质量 低于1 000的肽混合物I。‘ I。但是也有一些大豆肽超 出了定义的范围,例如大豆源生物活性肽Lunasin 由43个氨基酸组成 。 收稿13期:2013—12—23 第一作者:富校轶,女,高级工程师,主要从事大豆精深加_T研究,E-maih wfuxiaoyi@163.con 通讯作者:王舒然,男,教授,从事食品与疾病关系研究,E-maih shuranwang@163.con ■ 加工技疵 大豆源的生物活性肽具有多种健康益处,包 括免疫调节、抗氧化和降胆固醇等作用 ,这些功 效可以预防常见的慢性疾病,例如免疫力低下、 心血管疾病、癌症和肥胖。大豆肽可以在胃肠道 中被吸收,从而在特定的靶器官中发挥作用。目 前,大豆肽是食源生物活性肽研究领域中的一个 热点,具有广阔的应用潜力和巨大的市场价值。 首先从免疫调节的角度出发,综述了大豆肽 免疫调节作用的研究现状, 主要包括大豆肽对免 1.1大豆肽对非特异性免疫的调节作用 1.1.1对免疫脏器指数的影响胸腺和脾脏是重 要的免疫器官。胸腺是哺乳动物的中枢免疫器 官,是T淋巴细胞发育、成熟的部位,对机体的免 疫力有着重要的影响;脾脏是人体最大的外周免 疫器官,是B淋巴细胞发育、成熟的场所,也是机 体在抗原刺激下发生免疫应答的场所。胸腺和脾 疫脏的重量直接反应机体的免疫水平,是用来反映 大豆肽对非特异性免疫调节作用的初级指标。 疫系统中非特异性免疫、细胞免疫和体液免疫的 影响,从而为研发大豆肽功能性食品提供理论基 础。最后根据罔内外的研究成果,提出大豆肽在 免疫调节作用研究中仔在的问题和发展趋势。 1大豆肽的免疫调节作用 国明明等利用环磷酰胺建立免疫功能低下的 小鼠模型,观察大豆肽对免疫功能低下小鼠的免 疫调节作用,发现大豆肽对免疫功能低下小鼠的 机体免疫力有一定的增强作用,能显著提高免疫 低下小鼠的脾脏指数和胸腺指数 I。富校轶等以正 常小鼠为实验对象,研究超滤大豆蛋白肽对小鼠 免疫功能的调节作用,发现超滤大豆蛋白肽具有 增加免疫力的作用,但是脾脏指数和胸腺指数均 没有显著差异 I,可能是大豆肽对小鼠的免疫调节 功能与小鼠本身的免疫水平有关,大豆肽仅能增 加免疫低下小鼠的免疫脏器指数,却对免疫正常 小鼠的免疫脏器指数没影响。 根据 家颁布的《保健食品功能学评价程序 和检验方法》规定,对于一种具有免疫调节作用 的活性物质的功能评价指标是:采用动物喂养实 验或人体受食实验,考察受试物质对动物非特异 性免疫、细胞免疫和体液免疫的相关检测指标 中,有2个以上的检测结果显阳性,方可确定该活 性物质具有免疫调节的作用。目前,国内外关于 大豆肽免疫调节作用的研究,大多数是采用动物 实验进行的,常用的免疫功能评价方法见附图。 1.1.2对巨噬细胞的影响 巨噬细胞是机体非特 异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨 免疫功能测定 非特异性免疫 巨 细胞免疫 N 体液免疫 迟 K 噬 噬 清 溶 血 疫 球 蛋 细 细 发 型 细 胞 吞 胞 杀 超 敏 反 胞 活 性 素 白 含 旦 含 且 噬 试 菌 试 里 里 应 附图测 测 测 常用的免疫功能评价方法 加工技 ● .赫 翳黎 胞,主要为CD3、CD4)及Ts(抑制性T细胞,主要 为CD8),2者在免疫应答时互助互抗,维持相对 平衡。通过测定T淋巴细胞亚群可以反映机体的免 疫能力。 Egusa等用根霉菌产生的肽酶R制得的大豆肽 髓干细胞分化生成,具有吞噬病原微生物或其他 异物的作用。因此通过测定巨噬细胞的吞噬能力 和杀菌能力来反映大豆肽对非特异性免疫调节作 用的影响。 Yamauchi等以无菌小鼠为实验对象,通过放 射性核素释放实验测试大豆肽对巨噬细胞吞噬作 用的影响,发现大豆肽对巨噬细胞吞噬作用显著 高于酪蛋白肽 。Maruyama等利用胰蛋白酶水解大 在体外诱导小鼠脾细胞,利用流式细胞术检测 CD4 ,CD8 ,CD1 lb 和CD49b ,从而反映脾细胞 的淋巴细胞亚群。CD4 代表Th,是辅助T绌胞的 豆蛋白获得了一种氨基酸序列为MITLAIPVNKPGR 的大豆肽,这种活性肽表现出增强巨噬细胞吞噬 能力的活性,这种活性归因于N一端的蛋氨酸残基 和N一端的第三个氨基酸残基的影响 I。 1.2大豆肽对细胞免疫的调节作用 细胞免疫功能即T淋巴细胞功能,一般通过测 定脾淋巴细胞增殖和T淋巴细胞亚群来评价大豆肽 对细胞免疫的调节作用。 1.2.1 对脾淋巴细胞增殖的影响免疫应答的重 要过程是淋巴细胞的活化,而T淋巴细胞的活化是 细胞介导的免疫应答中不可缺少的内容。T淋巴细 胞活化的主要表现为细胞的增殖,克隆扩 增,并出现分化,南静止状态转变为效应细胞并 执行各种功能。T淋巴细胞受到刀豆蛋白(ConA)刺 激后。可出现代谢旺盛、蛋白质和核酸合成增 加、细胞体积增大并能进行的淋巴母细胞。T 淋巴细胞对ConA反应性的大小,可以反映机体的 细胞免疫水平。 Kong等在体外利用MTT(四甲基偶氮唑盐)法 检测大豆肽对淋巴细胞增值的影响,从而评价大 豆肽的免疫调节作用,发现低分子量的和含正电 荷的大豆肽可以显著的增强免疫调节作用 -。黄文 凯等在体外利用MTT法对比了超滤前后大豆肽对 脾淋巴细胞的增值能力,超滤后的大豆肽对脾淋 巴细胞增值能力促进更强--。I。 1.2.2对淋巴细胞亚群的影响T细胞亚群是机体 免疫系统中重要组成部分之一,包括Th(辅助T细 表面抗原,它分泌细胞因子及其表达的表面分子 调节免疫网络中其他细胞的生物活性,对启动免 疫反应、决定免疫反应的强弱及最终表现形式起 关键性的作用;CD8 代表Ts,是早期抗感染抗肿 瘤的分子。CD1lb 是典型的巨噬细胞和树突状细 胞的表面抗原,这些细胞在机体的防御功能中占 有重要的地位。CD49b 是自然杀伤细胞(NK)的表 面抗原,表达于NK细胞,用于从淋巴和非淋巴组 织单细胞悬液以及外周血或者体液中分选NK细 胞。结果发现大豆肽可以显著提高CD8 ,CD1 lb 和CD49b 的数量,代表可以激发脾细胞的免疫功 能”1-121 ̄Yimit等利用流式细胞术检测食用大豆肽的 健康志愿者前臂静脉血中的淋巴细胞亚群,发现 大豆肽可以显著提高CD1 lb 和CD56 的数量,表明 大豆肽可以调节机体的细胞免疫” 。 1.2.3对自然杀伤细胞(NK)的影响NK细胞被认 为是机体天然免疫的第一道防线,发挥连接非特 异性免疫和特异性免疫的桥梁作用,是机体天然 免疫防御系统中重要的效应细胞,具有非特异性 直接清除各种异物,杀伤细胞内寄生的病原体, 溶解各种病毒感染的细胞或肿瘤细胞而不需要明 显的抗原刺激。 余承高等以建立的大鼠高脂肥胖模型为研究 对象,观察大豆肽对实验大鼠的免疫调节作用, 结果显示大豆肽对NK细胞有显著的增强作用” 。 1-3 大豆肽对体液免疫的调节作用 体液免疫功能即B淋巴细胞功能,B淋巴细胞 ■ 加工技 是淋巴干细胞在鸟类法氏囊和哺乳类动物的骨髓 中分化成熟而来,成熟的B细胞主要定居于淋巴结 皮质浅层的淋巴小结和脾脏的红髓和白髓的淋巴 小结内。B细胞在抗原刺激下可分化为浆细胞,合 成和分泌免疫球蛋白,主要执行机体的体液免疫。 1.5 大豆肽对肠道粘膜菌群的调节作用 肠道不仅是消化和吸收器官,也是体内最大 的免疫器官,是免疫系统中第一道屏障。肠道粘 膜菌群的平衡是维持机体免疫功能的重要保障。 左伟勇等在日粮中添加2%大豆肽后,能显著降 低21龄仔猪空肠肠道大肠杆菌,提高乳酸杆菌 数,大豆肽可改善仔猪肠道微生物菌群结构,调 控机体肠道免疫功能 。赵芳芳通过体外实验和 肉仔鸡饲养实验,发现大豆肽可以显著促进有益 1.3.1对抗体生成细胞(PFC)的影响通过检测溶 血过程中血红蛋白的量来反映其抗体产生水平, 在一定程度上代表了机体的体液免疫水平。国明 明研究大豆肽对环磷酰胺致免疫低下小鼠和D一半 乳糖致衰老小鼠的免疫调节作用,通过比浊法测 定PFC,发现PFC显著增加,结果表明大豆肽能诱 导免疫低下小鼠和衰老小鼠的体液免疫应答,提 菌的增值,并使大肠杆菌等有害菌数量显著下 降,大豆肽通过调节鸡肠道菌群平衡起到免疫调 节的作用口…。 2问题和展望 高机体特异性免疫功能u 。 1-3.2 对血清溶血素的影响 血清溶血素水平 可反应机体的体液免疫功能,是体液中抗体、 补体等免疫因子参与的免疫反应。李红胜以含 有大豆肽的鼠粮饲喂小鼠,比浊法测定小鼠血 尽管大豆源生物活性肽可以调节机体的免疫 功能,但是从目前的国内外研究现状中发现,仍 然还有很多问题需要我们去面临和解决: (1)已经发现不同方法获得的大豆肽在发挥免 疫调节作用上有很大的差异,但是仍然不清楚制 备方法对大豆肽免疫调节作用的影响机理。 (2)目前的大豆肽多为混合肽,应该明确混合 物中到底是哪些分子结构具有免疫调节作用,便 于今后大豆肽的研究和开发。 (3)应对大豆肽免疫调节的机制进行深入研 清溶血素,随着大豆肽添加量的增加,血清溶 血素随之升高,大豆肽对免疫小鼠溶血素的产 生具有明显的激发作用,一定程度的提高小鼠 特异性免疫功能 1。 1.4 大豆肽对细胞因子(CK)的调节作用 细胞因子指一类由细胞分泌、具有多种功能 的高活性小分子蛋白质,其在免疫细胞分化发 育、免疫应答、免疫调节、炎症反应、造血功能 中发挥重大作用。 Yoshikawa等发现大豆肽可以诱导小鼠产生肿 瘤坏死因子,从而起到免疫调节的作用” 。Tsuruki 等研究表明大豆源生物活性肽soymetide一4对TNF一 有明显的激活作用,而且这种免疫活性肽还可以 抑制依托泊苷诱导新生大鼠脱发u 。Egusa等利用 大豆肽在体外诱导小鼠脾细胞,通过流式细胞术 检测IL一2,IL一4,IL—l2和INF一 四种淋巴因子, 结果显示大豆肽可以增加这四种淋巴因子的数 量,具有免疫调节作用 ”。 究,比如与免疫相关的信号通路等。 (4)应对大豆肽在体内的吸收和分布等代谢特 性进行研究。 大豆肽不仅可以提高大豆产品的附加值,也 可以赋予大豆产品特殊的功能。随着对大豆肽的 深入研究,相信大豆肽将具有更为广阔的应用 前景。 参考文献: ’ [1] Alder-Nissen.Determination of the degree of hydrolysis of food protein hydrolyzates by trinitrobenzene sulfonnic acid[J1.Agric Food Chem,1989,(27):17—20. 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